BÁO CÁO: KẾT QUẢ THỰC HÀNH
TÁCH CHIẾT DNA
Thứ … ngày … tháng … năm …
Nhóm:… Lớp:… Họ và tên thành viên:…
1. Mục đích thực hiện thí nghiệm
- Tách chiết được DNA từ các mẫu vật sống.
2. Kết quả và giải thích
a. Trình bày kết quả tách chiết và nhận biết DNA (kèm hình ảnh minh hoạ).
- Sau khi để yên trong vòng 5 phút, thấy xuất hiện búi kết tủa trắng đục chứa DNA nằm lơ lửng trong lớp cồn.
- Khi cho búi DNA vào ống nghiệm chứa diphenylamine và đun cách thủy thì búi màu trắng sẽ chuyển dần sang màu xanh.
b. Giải thích kết quả thực hành dựa trên các câu hỏi sau:
- Quá trình cắt nhỏ và giã nhuyễn gan (hoặc cải) có tác dụng phá vỡ tế bào gan (hoặc cải).
- Việc cho nước rửa bát và dịch chiết nước dứa vào dịch chiết mô có tác dụng:
+ Do DNA tồn tại trong nhân tế bào nên để tách chiết được DNA ra khỏi tế bào, cần phá vỡ mô để tách rời các tế bào và phá huỷ thành tế bào và phá huỷ màng tế bào, màng nhân bằng các dung dịch tẩy rửa hoà tan lipid nhằm giải phóng dịch nhân tế bào vào dung dịch chiết xuất.
+ Trong tế bào, DNA liên kết với nhiều protein (như histone, các protein điều hoà và phiên mã), nên cần loại bỏ các protein bằng enzyme phân giải protein là protease (có trong nước ép dứa tươi) để phân cắt chuỗi polypeptide thành các amino acid đơn phân hoặc đoạn peptide nhỏ, lúc đó dung dịch sẽ chỉ còn các đại phân tử DNA và RNA.
- Việc cho ethanol lạnh vào hỗn hợp có tác dụng: Do ethanol có ái lực với nước mạnh hơn với DNA nên khi cho cồn ethanol vào dịch chiết chứa DNA thì các phân tử DNA có xu hướng bị đầy sát lại gần nhau và kết tụ lại với nhau dưới dạng vật chất có màu trắng dục.
- Khi lấy DNA bằng tăm tre cần khuấy thật nhẹ vì: DNA bị kết tủa (biến tính) nên rất dễ đứt gãy, cần phải nhẹ tay khi thao tác để vớt DNA ra khổi ống nghiệm.
3. Kết luận
- Có thể tách chiết DNA từ các mô thực vật hoặc mô động vật.